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韦伯在实验室里坐了整整一个下午。
他把实验记录本摊在桌上,旁边摆着三台不同品牌的温度记录仪、一台pH计、一个细胞计数板,还有一叠刚打印出来的文献。
阳光从窗户斜射进来,在桌面上投下一道明亮的光斑,光斑里漂浮着细小的尘埃,像无数正在做布朗运动的微粒。
“培养箱温度波动记录。”
他自言自语,在第一页纸上写下标题。
过去三个小时,他每隔十分钟记录一次培养箱的实际温度。
设定值是三十七度,但实际读数在三十六点八到三十七点三之间波动。
每次开门取放细胞,温度会骤降到三十五度左右,然后需要十五分钟才能恢复到设定值。
这十五分钟的低温暴露,对大多数细胞来说无关紧要,但对某些敏感的干细胞分化体系,可能就是致命的干扰。
“但上周做实验的时候,温度波动也是这样的。”
韦伯皱着眉头,在纸上画了一条曲线,“如果温度是变量,那上周的数据也应该失败。”
他放下笔,走到细胞培养室,打开培养箱的门。
里面摆满了培养皿,像一个个透明的飞碟,整齐地排列在金属架子上。
他取出自己的那批干细胞,放在倒置显微镜下观察。
细胞形态正常,贴壁良好,没有明显的污染迹象。
但他注意到一个细节:培养皿边缘的细胞密度似乎比中心区域略高一些。
这说明在接种的时候,细胞悬液没有充分混匀,导致分布不均匀。
“细胞密度……”
韦伯喃喃自语,突然想起什么,快步走回办公桌,翻开实验记录本。
上周那个“漂亮数据”
的实验记录上,细胞计数那一栏写的是“1.2x10^6ml”
。
而这三次失败的记录,细胞计数同样是“1.2x10^6ml”
。
数字相同,但实际操作中,计数误差通常在百分之十到二十之间。
如果上周的实际密度是1.0x10^6ml,而这三次的实际密度是1.4x10^6ml,那么细胞在接种时的状态就可能完全不同。
“不,不对。”
韦伯摇了摇头,“密度差异会影响增殖速度,但不会改变分化方向。
条件培养基组和对照组的差异应该仍然存在,只是幅度不同。”
他靠在椅背上,闭上眼睛,在脑海里把整个实验流程重新过了一遍。
从细胞复苏到接种,从培养基配制到条件培养基添加,从染色到流式检测……每一个环节都像是电影画面一样在脑海中闪过。
突然,一个画面定格了。
上周做实验的那天上午,他在配制条件培养基的时候,实验室的空调正在维修,室温比平时高了大约三度。
他记得自己当时还抱怨过太热,脱掉了白大褂。
而这三次重复实验,都是在空调正常运转的情况下做的,室温保持在二十三度。
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